情報広場（話題の分析例）

vol.69（2004.08.25） マイクロプレートリーダを用いた簡便な遺伝的多型検出方法

薬物代謝には酵素が働き、個人差があるために遺伝的多型（SNP）が注目されています。この遺伝子多型を検出するための方法にはシーケンス法、PCR−RFLP法等があります。マイクロプレートリーダを用いると多検体測定、短時間検出が可能になります。（ASP＊-PCR法） *ASP:Allele Specific Primer（アリル特異的プライマー） 遠心（抽出）→PCR → 電 気 泳 動 → 1日 → マイクロプレートリーダ+Syber(R)Green → 3時間

ヒトシトクロムP450SNPタイピングキット、Syber(R) Green �Tを用いた測定例 MTP-600Fのタイピングキットによる5回繰り返し測定（CV値） 「マイクロプレートリーダ」 96穴すべて、10％未満であり良好！ 単位：% 測定条件 MODE1：蛍光強度 MIXINGTIME：20S MODE2：1Ex-1Em MIXINGMODE：直線 Ex：360、Em：535 MIXINGLEVEL：中 SENS：X10 TEMP：OFF 測定方向：縦 KINETIC：OFF RESPONSE：4 - 測定結果→個人差が分かります！ 　 ヒストグラム表 *本内容は東京大学医学部付属病院 薬剤部 久保田先生にご指導いただきました。 コロナ電気（株）製 蛍光マイクロプレートリーダ MTP-600F （フィルタ付 EX360nm,EM535nm） \3,500,000〜 東洋紡績(株）製 SNP Typing Kit Cytochrome P450 2D6＊10（100C→T） \40,000− （200回） ヒトシトクロムP450（CYP） タイピングフローチャート *Syber(R)Green �TはMolecular Probes, Inc.の登録商標です。